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作者:admin    来源:未知    发布时间:2020-02-22

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作者首先使用小鼠骨髓衍生的巨噬细胞(BMM)作为主要破骨细胞前体检查了破骨细胞生成过程中miR-182的表达水平。RANKL作为主要的破骨细胞生成诱导剂时,miR-182表达在破骨细胞分化的时间过程中增加(Fig 1a)。紧接着作者构建了miR-182破骨细胞条件基因敲除鼠(Mir182ΔM/ΔM),以及miR-182破骨细胞条件基因敲入鼠(Mir182MTG),分别与其同窝野生型小鼠(WT)作对照进行研究。结果显示与WT小鼠培养的细胞相比,Mir182ΔM/ΔM 小鼠培养的细胞由于miR-182缺乏,显著抑制由RANKL诱导的TRAP阳性多核破骨细胞形成(Fig 1b)。相对于WT组小鼠的对照细胞,抑制TRAP阳性多核的产生同时,关键的破骨细胞生成转录因子Nfatc1(编码NFATc1)和Prdm1(编码Blimp1)以及破骨细胞标记基因Acp5(编码TRAP),Ctsk(编码组织蛋白酶K)和Itgb3的表达(编码β3整联蛋白)在RANKL处理的Mir182ΔM/ΔM小鼠细胞中显著降低(Fig 1c)。接着作者在使用RANKL诱导人CD14阳性外周血单核细胞(PBMC)衍生的破骨细胞前体向破骨细胞生成的过程中,也发现miR-182表达在破骨细胞分化的时间过程中增加(Fig 1d)。与WT组培养的细胞相比,Mir182抑制剂作用的细胞由于miR-182缺乏,显着抑制由RANKL诱导的TRAP阳性多核破骨细胞形成(Fig 1e)。相对于WT组的对照细胞,抑制TRAP阳性多核的产生同时,关键的破骨细胞生成转录因子和NFATC1,PRDM1,CALCR(编码降钙素受体)和ITGB3的破骨细胞基因表达在RANKL刺激的Mir182抑制剂处理组细胞中显着降低(Fig 1f)。下一步,作者研究miR-182作为破骨细胞生成调节剂起作用的机制。首先分别对WT对照和Mir182ΔM/ΔM小鼠的基线破骨细胞前体和RANKL刺激后的破骨细胞RNAs(RNA-seq)做了高通量测序来进行基因表达延伸,以鉴定在破骨细胞生成期间由miR-182调节的基因。结果表明miR-182的缺乏显着抑制破骨细胞生成调节因子(例如NFATc1和Prdm1)和破骨细胞标记基因(例如TRAP,组织蛋白酶K,OCSTAMP、DCSTAMP和Atp6v0d2)的表达。GO分析和GSEA分析提示IFN途径与miR-182缺失的关系。作者又查阅了先前的文献证明干扰素途径(IFNα,β或γ)抑制破骨细胞分化。 RANKL在破骨细胞中诱导的内源性IFN-β是维持平衡分化状态的重要抑制反馈环。因此,作者认为Mir182ΔM/ΔM细胞中I型IFN应答基因组的高度显着富集反映了显着增强的IFN途径,并且可以通过这个来解释miR-182缺失抑制的破骨细胞生成的表型(Fig4a-d)。PLC-181车载155毫米加农榴弹炮是我国最新列装的新型车载加榴炮,首次亮相于2018年73集团军某部。该车载炮装备一门52倍口径的加农榴弹炮。可以发射包括底排弹和底凹弹,末敏弹等多种炮弹,在精确打击时候还可以发射激光制导炮弹和卫星制导炮弹,最大射程可达50公里以上。手机qq录屏功能怎么用

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